เนื้อหา
- การทดสอบ ELISA: หลักการคืออะไร?
การทดสอบ ELISA: หลักการคืออะไร?
คำจำกัดความ: การทดสอบ ELISA คืออะไร?
เทคนิคการทดสอบด้วยเอนไซม์ immunoabsorption assay ที่เชื่อมโยงกัน ในภาษาอังกฤษ Enzyme-Linked Immuno Assay หรือการทดสอบ ELISA เป็นการทดสอบทางภูมิคุ้มกันซึ่งช่วยให้สามารถตรวจจับหรือวิเคราะห์โมเลกุลในตัวอย่างทางชีววิทยาได้ เป็นแนวคิดและพัฒนาโดยนักวิทยาศาสตร์ชาวสวีเดนสองคนคือ Peter Perlmann และ Eva Engvall ที่มหาวิทยาลัยสตอกโฮล์มในปี 1971
โมเลกุลที่วิเคราะห์โดยวิธี ELISA โดยทั่วไปจะเป็นโปรตีน และประเภทตัวอย่างรวมถึงสารชีวภาพของไหล เช่น พลาสมา ซีรั่ม ปัสสาวะ เหงื่อออก สารเพาะเลี้ยงเซลล์ หรือโปรตีนลูกผสม ซึ่งเป็นโปรตีนที่ผลิตโดยเซลล์ซึ่งสารพันธุกรรมได้รับการเปลี่ยนแปลงโดยการรวมตัวกันใหม่ทางพันธุกรรม - ทำให้บริสุทธิ์เป็นสารละลาย
การทดสอบ ELISA ส่วนใหญ่ใช้ในวิทยาภูมิคุ้มกันเพื่อตรวจหาและ/หรือวัดการมีอยู่ของโปรตีน แอนติบอดี หรือแอนติเจนในตัวอย่าง การทดสอบทางซีรั่มนี้จะตรวจหาแอนติบอดีที่ร่างกายผลิตขึ้นโดยเฉพาะเพื่อตอบสนองต่อการปนเปื้อนของไวรัส
หลักการทดสอบ ELISA สำหรับโรคติดเชื้อ
การใช้แอนติบอดีในการวินิจฉัยโรคติดเชื้อเป็นวิธีที่เฉพาะเจาะจงและรวดเร็ว เทคนิค ELISA เป็นเทคนิคภูมิคุ้มกัน-เอนไซม์ ซึ่งทำให้สามารถมองเห็นได้จากตัวอย่างทางชีววิทยา ปฏิกิริยาระหว่างแอนติเจน - ร่างกายที่สิ่งมีชีวิตถือว่าแปลกปลอม - และแอนติบอดีโดยใช้ปฏิกิริยาสีที่เกิดจากเครื่องหมายของเอนไซม์ - โดยทั่วไปอัลคาไลน์ฟอสฟาเตสและเปอร์ออกซิเดส – ก่อนหน้านี้ติดอยู่กับแอนติบอดี ปฏิกิริยาของสียืนยันการระบุแบคทีเรียที่แยกได้หรือการมีอยู่ของไวรัสที่ต้องการ และความเข้มของสีบ่งบอกถึงปริมาณของแอนติเจนหรือแอนติบอดีในตัวอย่างที่กำหนด
การทดสอบ ELISA ประเภทต่างๆ
การทดสอบ ELISA มีสี่ประเภทหลัก:
- ELISA โดยตรงทำให้สามารถตรวจจับหรือวัดแอนติบอดี้ได้ ใช้เฉพาะแอนติบอดีหลักเท่านั้น
- ELISA ทางอ้อมซึ่งใช้กันอย่างแพร่หลายที่สุด ยังทำให้สามารถตรวจจับหรือทดสอบแอนติบอดีได้อีกด้วย ใช้แอนติบอดีทุติยภูมิซึ่งให้ความไวได้ดีกว่า ELISA โดยตรง
- ELISA ในการแข่งขัน,ช่วยให้ปริมาณแอนติเจน. ผลิตโดยการแข่งขันเพื่อพันธะ ไม่ใช้เอนไซม์
- ELISA «ในแซนวิช»,ช่วยให้ปริมาณแอนติเจน. เทคนิคนี้มักใช้ในการวิจัย
การใช้การทดสอบ ELISA
การทดสอบ ELISA ใช้สำหรับ:
- ค้นหาและวัดแอนติบอดีในซีรัมวิทยาสำหรับการวินิจฉัยโรคติดเชื้อ: ไวรัสวิทยา ปรสิตวิทยา แบคทีเรียวิทยา ฯลฯ
- ปริมาณโปรตีนที่ความเข้มข้นต่ำ: ปริมาณเฉพาะของโปรตีนในพลาสมาบางชนิด (อิมมูโนโกลบูลิน E (IgE), เฟอร์ริติน, ฮอร์โมนโปรตีน ฯลฯ ) เครื่องหมายเนื้องอก ฯลฯ ;
- ปริมาณโมเลกุลขนาดเล็ก: ฮอร์โมนสเตียรอยด์, ฮอร์โมนไทรอยด์, ยา ...
กรณีที่พบบ่อยที่สุด: โควิด-19, ไข้เลือดออก, เอชไอวี, ไลม์, ภูมิแพ้, การตั้งครรภ์
การทดสอบ ELISA ใช้เพื่อวินิจฉัยโรคติดเชื้อต่างๆ โดยเฉพาะ:
โรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์ (STDs)
รวมทั้งโรคตับอักเสบ ซิฟิลิส หนองในเทียม และเอชไอวี ตามคำแนะนำของหน่วยงานด้านสุขภาพ การทดสอบนี้เป็นการตรวจคัดกรองโรคเอดส์หลัก โดยแสดงให้เห็นว่ามีแอนติบอดีต้านเอชไอวีและแอนติเจน p24 หลังการติดเชื้อ XNUMX สัปดาห์
โรคประจำถิ่นหรือโรคประจำถิ่น
ไข้เหลือง, โรคไวรัสมาร์บูร์ก (MVM), Ladengue, โรค Lyme, Chikungunya, ไข้ Rift Valley, อีโบลา, ไข้ลาสซา ฯลฯ
โควิด-19
ในการดำเนินการมากกว่า 2 ถึง 3 สัปดาห์หลังจากเริ่มมีอาการ การทดสอบ ELISA ทำให้สามารถระบุการมีอยู่ของแอนติบอดีต้าน SARS-CoV-2 ได้ภายในเวลาไม่ถึงหนึ่งชั่วโมง
ไวรัสที่ทำให้เกิดการติดเชื้อก่อนคลอด
Toxoplasmosis, หัดเยอรมัน, cytomegalovirus, เริมเป็นต้น
กรณีอื่น ๆ
แต่เขายังพบแอปพลิเคชั่นในการตรวจจับ:
- การตั้งครรภ์;
- โรคแพ้ภูมิตัวเอง;
- สารก่อภูมิแพ้ในอาหาร: การกำหนดเชิงปริมาณของอิมมูโนโกลบูลินทั้งหมด E (IgE) ช่วยในการประเมินและรักษาอาการแพ้
- ความผิดปกติของฮอร์โมน
- เครื่องหมายเนื้องอก;
- ไวรัสพืช
- และอื่น ๆ อีกมากมาย
ความน่าเชื่อถือของการทดสอบ Covid-19
เป็นส่วนหนึ่งของการตรวจหาแอนติบอดีต้าน SARS-CoV-2 การศึกษานำร่องที่ดำเนินการในเดือนสิงหาคม 2020 โดย Institut Pasteur, CNRS, Inserm และ University of Paris ยืนยันความน่าเชื่อถือของการทดสอบ ELISA: ทั้งการทดสอบ ELISA ที่ทดสอบแล้ว โปรตีน N ทั้งหมดของ SARS-CoV-2 (ELISA N) หรือโดเมนนอกเซลล์ของไวรัส Spike (S) เป็นแอนติเจนเป้าหมาย เทคนิคนี้จะทำให้สามารถระบุแอนติบอดีได้มากกว่า 90% ของกรณีทั้งหมด โดยมีอัตรา false-positive ที่ต่ำมากที่ 1%
ราคาและการชำระเงินคืนของการทดสอบ ELISA
ดำเนินการในห้องปฏิบัติการวิเคราะห์เกี่ยวกับใบสั่งแพทย์ การทดสอบ Elisa มีค่าใช้จ่ายประมาณ 10 ยูโร และจะได้รับเงินคืน 100% โดยประกันสุขภาพ
ดำเนินการในศูนย์ข้อมูล การตรวจคัดกรองและวินิจฉัยฟรี (CeGIDD) โดยไม่มีค่าใช้จ่ายสำหรับ HIV และ SARS-CoV-2