การทดสอบ ELISA: หลักการคืออะไร?

การทดสอบ ELISA: หลักการคืออะไร?

คำจำกัดความ: การทดสอบ ELISA คืออะไร?

เทคนิคการทดสอบด้วยเอนไซม์ immunoabsorption assay ที่เชื่อมโยงกัน ในภาษาอังกฤษ Enzyme-Linked Immuno Assay หรือการทดสอบ ELISA เป็นการทดสอบทางภูมิคุ้มกันซึ่งช่วยให้สามารถตรวจจับหรือวิเคราะห์โมเลกุลในตัวอย่างทางชีววิทยาได้ เป็นแนวคิดและพัฒนาโดยนักวิทยาศาสตร์ชาวสวีเดนสองคนคือ Peter Perlmann และ Eva Engvall ที่มหาวิทยาลัยสตอกโฮล์มในปี 1971

โมเลกุลที่วิเคราะห์โดยวิธี ELISA โดยทั่วไปจะเป็นโปรตีน และประเภทตัวอย่างรวมถึงสารชีวภาพของไหล เช่น พลาสมา ซีรั่ม ปัสสาวะ เหงื่อออก สารเพาะเลี้ยงเซลล์ หรือโปรตีนลูกผสม ซึ่งเป็นโปรตีนที่ผลิตโดยเซลล์ซึ่งสารพันธุกรรมได้รับการเปลี่ยนแปลงโดยการรวมตัวกันใหม่ทางพันธุกรรม - ทำให้บริสุทธิ์เป็นสารละลาย

การทดสอบ ELISA ส่วนใหญ่ใช้ในวิทยาภูมิคุ้มกันเพื่อตรวจหาและ/หรือวัดการมีอยู่ของโปรตีน แอนติบอดี หรือแอนติเจนในตัวอย่าง การทดสอบทางซีรั่มนี้จะตรวจหาแอนติบอดีที่ร่างกายผลิตขึ้นโดยเฉพาะเพื่อตอบสนองต่อการปนเปื้อนของไวรัส

หลักการทดสอบ ELISA สำหรับโรคติดเชื้อ

การใช้แอนติบอดีในการวินิจฉัยโรคติดเชื้อเป็นวิธีที่เฉพาะเจาะจงและรวดเร็ว เทคนิค ELISA เป็นเทคนิคภูมิคุ้มกัน-เอนไซม์ ซึ่งทำให้สามารถมองเห็นได้จากตัวอย่างทางชีววิทยา ปฏิกิริยาระหว่างแอนติเจน - ร่างกายที่สิ่งมีชีวิตถือว่าแปลกปลอม - และแอนติบอดีโดยใช้ปฏิกิริยาสีที่เกิดจากเครื่องหมายของเอนไซม์ - โดยทั่วไปอัลคาไลน์ฟอสฟาเตสและเปอร์ออกซิเดส – ก่อนหน้านี้ติดอยู่กับแอนติบอดี ปฏิกิริยาของสียืนยันการระบุแบคทีเรียที่แยกได้หรือการมีอยู่ของไวรัสที่ต้องการ และความเข้มของสีบ่งบอกถึงปริมาณของแอนติเจนหรือแอนติบอดีในตัวอย่างที่กำหนด

การทดสอบ ELISA ประเภทต่างๆ

การทดสอบ ELISA มีสี่ประเภทหลัก:

  • ELISA โดยตรงทำให้สามารถตรวจจับหรือวัดแอนติบอดี้ได้ ใช้เฉพาะแอนติบอดีหลักเท่านั้น
  • ELISA ทางอ้อมซึ่งใช้กันอย่างแพร่หลายที่สุด ยังทำให้สามารถตรวจจับหรือทดสอบแอนติบอดีได้อีกด้วย ใช้แอนติบอดีทุติยภูมิซึ่งให้ความไวได้ดีกว่า ELISA โดยตรง
  • ELISA ในการแข่งขัน,ช่วยให้ปริมาณแอนติเจน. ผลิตโดยการแข่งขันเพื่อพันธะ ไม่ใช้เอนไซม์
  • ELISA «ในแซนวิช»,ช่วยให้ปริมาณแอนติเจน. เทคนิคนี้มักใช้ในการวิจัย

การใช้การทดสอบ ELISA

การทดสอบ ELISA ใช้สำหรับ:

  • ค้นหาและวัดแอนติบอดีในซีรัมวิทยาสำหรับการวินิจฉัยโรคติดเชื้อ: ไวรัสวิทยา ปรสิตวิทยา แบคทีเรียวิทยา ฯลฯ
  • ปริมาณโปรตีนที่ความเข้มข้นต่ำ: ปริมาณเฉพาะของโปรตีนในพลาสมาบางชนิด (อิมมูโนโกลบูลิน E (IgE), เฟอร์ริติน, ฮอร์โมนโปรตีน ฯลฯ ) เครื่องหมายเนื้องอก ฯลฯ ;
  • ปริมาณโมเลกุลขนาดเล็ก: ฮอร์โมนสเตียรอยด์, ฮอร์โมนไทรอยด์, ยา ...

กรณีที่พบบ่อยที่สุด: โควิด-19, ไข้เลือดออก, เอชไอวี, ไลม์, ภูมิแพ้, การตั้งครรภ์

การทดสอบ ELISA ใช้เพื่อวินิจฉัยโรคติดเชื้อต่างๆ โดยเฉพาะ:

โรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์ (STDs)

รวมทั้งโรคตับอักเสบ ซิฟิลิส หนองในเทียม และเอชไอวี ตามคำแนะนำของหน่วยงานด้านสุขภาพ การทดสอบนี้เป็นการตรวจคัดกรองโรคเอดส์หลัก โดยแสดงให้เห็นว่ามีแอนติบอดีต้านเอชไอวีและแอนติเจน p24 หลังการติดเชื้อ XNUMX สัปดาห์

โรคประจำถิ่นหรือโรคประจำถิ่น

ไข้เหลือง, โรคไวรัสมาร์บูร์ก (MVM), Ladengue, โรค Lyme, Chikungunya, ไข้ Rift Valley, อีโบลา, ไข้ลาสซา ฯลฯ

โควิด-19

ในการดำเนินการมากกว่า 2 ถึง 3 สัปดาห์หลังจากเริ่มมีอาการ การทดสอบ ELISA ทำให้สามารถระบุการมีอยู่ของแอนติบอดีต้าน SARS-CoV-2 ได้ภายในเวลาไม่ถึงหนึ่งชั่วโมง

ไวรัสที่ทำให้เกิดการติดเชื้อก่อนคลอด

Toxoplasmosis, หัดเยอรมัน, cytomegalovirus, เริมเป็นต้น

กรณีอื่น ๆ

แต่เขายังพบแอปพลิเคชั่นในการตรวจจับ:

  • การตั้งครรภ์;
  • โรคแพ้ภูมิตัวเอง;
  • สารก่อภูมิแพ้ในอาหาร: การกำหนดเชิงปริมาณของอิมมูโนโกลบูลินทั้งหมด E (IgE) ช่วยในการประเมินและรักษาอาการแพ้
  • ความผิดปกติของฮอร์โมน
  • เครื่องหมายเนื้องอก;
  • ไวรัสพืช
  • และอื่น ๆ อีกมากมาย

ความน่าเชื่อถือของการทดสอบ Covid-19

เป็นส่วนหนึ่งของการตรวจหาแอนติบอดีต้าน SARS-CoV-2 การศึกษานำร่องที่ดำเนินการในเดือนสิงหาคม 2020 โดย Institut Pasteur, CNRS, Inserm และ University of Paris ยืนยันความน่าเชื่อถือของการทดสอบ ELISA: ทั้งการทดสอบ ELISA ที่ทดสอบแล้ว โปรตีน N ทั้งหมดของ SARS-CoV-2 (ELISA N) หรือโดเมนนอกเซลล์ของไวรัส Spike (S) เป็นแอนติเจนเป้าหมาย เทคนิคนี้จะทำให้สามารถระบุแอนติบอดีได้มากกว่า 90% ของกรณีทั้งหมด โดยมีอัตรา false-positive ที่ต่ำมากที่ 1%

ราคาและการชำระเงินคืนของการทดสอบ ELISA

ดำเนินการในห้องปฏิบัติการวิเคราะห์เกี่ยวกับใบสั่งแพทย์ การทดสอบ Elisa มีค่าใช้จ่ายประมาณ 10 ยูโร และจะได้รับเงินคืน 100% โดยประกันสุขภาพ

ดำเนินการในศูนย์ข้อมูล การตรวจคัดกรองและวินิจฉัยฟรี (CeGIDD) โดยไม่มีค่าใช้จ่ายสำหรับ HIV และ SARS-CoV-2

เขียนความเห็น